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研究院肯定是没有切割机和焊枪的,秦铮带着宋泽出去,就近找了个小工厂。
DNA序检测主主要分为:提取,扩增,分离和检测四个步骤。
提取DNA样本,去除杂质、纯化,这一系列操作目前的技术足够支撑。
关键在于怎么进行样本扩增和检测。
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核酸体外扩增的设想,其实早在几年前国外就有人提出来过,但由于基因序列分析的方法不成熟,也没有稳定的DNA聚合酶和易得的引物,这个想法就被暂时搁置了。
苏落也是了解到国内刚发现了稳定的TaqDNA聚合酶,她提出聚合酶链式反应这个想法,虽然超前,但也不至于太变态而被当成外星人。
她给翟浚永的纸上直接写明了反应所需的五要素,从缓冲液,TaqDNA聚合酶用量,dnTP和引物的浓度的范围,都写得清清楚楚。
虽然只是一个大致参考值,但实验几次就能做出来。
翟浚永一边实验,一边给张琳琳讲解。
经过25~30个循环后,DNA数量扩增到了106~109倍。
“老郑,交给你了。”
郑克寅从来没觉得一支试管有这么重。
他屏住呼吸,小心翼翼地把提取液放进刚刚搭建起来的凝胶电泳仪里。
从某种意义上说,DNA和RNA多核苷酸链是一种多聚阴离子,所以当处在电场中时,他们会向正电极的方向迁移。
核酸分子的大小、构成和形态差异,以及所带电荷量的多少,都会影响他们迁移的速度,如此一来,就能将DNA片段分离出来。
下面的部分,苏落让张琳琳来做。
“我?”小丫头吓得一大跳,连连摆手,“苏老师,我不行,不行的。”
“没事,我在旁边指导你。”
苏落的眼神里含着鼓励,张琳琳被她看着,心里莫名就有了底气。
咬咬牙,点头,“嗯!”
最后一步,将电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后用非同位素标记进行检测,就可以得到一个电泳图谱。
“成了!成了!”
郑克寅和翟浚永先是不敢相信,紧接着两个人都红了眼眶。
外国还不成熟的技术,被他们这么三下五除二鼓捣了出来,怎么能不激动?
不不不,也没有三下五除二那么简单。
毕竟,苏落是把原理和操作流程都嚼碎了喂到他们嘴里。
【本章节纯属虚构,大家看个乐呵,轻些骂,鞠躬~】
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